胃泌素ELISA試劑盒是用于定量檢測血清、血漿等生物樣本中胃泌素含量的科研專用試劑,僅可用于科研實驗,不得用于臨床診斷。
胃泌素ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法,將純化的胃泌素捕獲抗體包被在微孔板上,依次加入樣本、HRP標(biāo)記的檢測抗體,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)洗滌后加入底物TMB顯色,顏色深淺與樣本中胃泌素含量正相關(guān),通過酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度,結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣本中胃泌素的實際濃度。
樣本處理要求:
血清樣本:室溫血液自然凝固10-20分鐘,2000-3000轉(zhuǎn)/分離心20分鐘,收集上清,避免樣本溶血,溶血樣本會直接影響檢測結(jié)果。
血漿樣本:選用EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,2000-3000轉(zhuǎn)/分離心20分鐘,收集上清。
樣本采集后盡早提取,若不能立即實驗,可置于-20℃保存,避免反復(fù)凍融,不可檢測含NaN3的樣本,其會抑制辣根過氧化物酶活性。
操作與保存注意事項:
試劑盒從冷藏環(huán)境取出后,需在室溫平衡15-30分鐘再使用,未用完的酶標(biāo)板條需裝入密封袋中干燥保存。
各步加樣需使用校準(zhǔn)后的高精度加樣器,一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),樣本數(shù)量較多時推薦使用排槍加樣,每次測定需同步做標(biāo)準(zhǔn)曲線,建議設(shè)置復(fù)孔提升結(jié)果重復(fù)性。
未開封的試劑盒需將標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液、酶標(biāo)板置于-20℃保存,使用后的剩余試劑按標(biāo)簽要求溫度存放,開封后的酶標(biāo)板需加干燥劑密封保存,避免受潮。